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解析微生物检验培养基制备的九个步骤关注要点

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ningxueqin 发表于 2021-11-18 20:15 | 显示全部楼层 |阅读模式
  微生物检验培养基制备有多少步骤?每步应怎么操作?微生物过滤漏斗大家解析微生物检验培养基制备的九个步骤关注要点。

  步骤一:称取数量

  用1/100的电子天平称出培养基所需的药物。首先参照配方计算出配制相应培养基需要各成分的数量,然后用电子天平准确称取重量(将称量纸折叠成簸箕盛药)。

  解析微生物检验培养基制备的九个步骤

  步骤二:培养基溶化

  将中海培养基纳入烧杯容器中,加小适量的水,缓慢加水并用玻璃棒小幅度搅拌。倘若培养基中不含琼脂,则不需要对培养基加热;相反含有琼脂,就需要用本生灯/电磁炉加热煮沸。待培养基完全溶解后再加入适量的水搅拌均匀。如准备的北京中海培养基较多,在不锈钢锅中融化加热,可以用温水加热,需不停搅拌,防止焦化。如果不小心出现焦化现象,则制备好的培养基将无法使用,必须重新配制中海生物培养基。

  不要使用铜或铁容器溶解制备培养基,因为铜或铁容器可能会导致容器内培养基中铜、铁超标,影响实验结果,其中培养基中铜含量大于0.3毫克每升,细菌不适宜生长。

  铁含量超过0.14毫克每升,防止细菌产生毒素。容易发生反应和沉淀的药物应单独溶解,然后加入培养基中,如磷酸氢二钾和硫酸镁。

  步骤三:调培养基pH

  虽然中海培养基中含有缓冲物质,可以尽量使培养基的pH值保持在标准范围内,但如果配制的培养基不能要求,则必须进行必要的调整。如果您有校准过的 pH 计,则可以使用 pH 计。如果没有,可以使用精确的pH试纸,然后根据需要使用1 mol/L氢氧化钠或1 mol/L盐酸进行微调。使用 0.1 氢氧化钠或 0.1 mol/L 盐酸进行调整至所需的pH值。

  培养基有酸性或碱性,pH值一般为7.4——7.6。对于需要用氢氧化钠高压灭菌的介质,将pH调至比要求值高0.1——0.2个单位,因为用氢氧化钠调节时,高压灭菌后介质的pH值要降低0.1 ——0.2。如果微生物培养基中含有碳酸钙,则无需调整pH值。

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